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鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒操作步骤及样品收集、处理、保存方法
发布时间:2021-08-24 15:29:10

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒操作步骤及样品收集、处理、保存方法


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据技术部8月24日上午15点22分透露:(http://www.spbio.cn/cont/5469.html)


鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆及相关液体

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒试验原理:

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒是采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)方法。

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒内容及其配制

试剂盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶标板

1块板(96T)

半块板(48T)

塑料膜板盖

1块

半块

标准品:

1瓶(0.6ml)

1瓶(0.3ml)

空白对照

1瓶(1.0ml)

1瓶(0.5ml)

标准品稀释缓冲液

1瓶(6ml)

1瓶(3.0ml)

生物素标记的抗BA抗体

1瓶(6ml)

1瓶(3.0ml)

亲和链酶素-HRP

1瓶(6ml)

1瓶(3.0ml)

洗涤缓冲液

1瓶(20ml)

1瓶(20ml)

底物A

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

底物B

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

终止液

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

标本稀释液

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

 1.jpg

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒安全性

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒操作注意事项

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂,应包装好或盖好,不同批号的试剂不要混用,保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A易挥发,避免长时间打开盖子,底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒,实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法

1、 血  清-----操作过程中避免任何细胞刺激,使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血  浆----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测,1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液--1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆---将组织加入适量生理盐水捣碎,1000×g离心10分钟,取上清液。

5、 保  存----如果样品不立即使用,应将其分成小部分-80 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤,不要在37℃或更高的温度加热解冻,应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒试剂的准备

1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存,稀释前将标准品振荡混匀,稀释比例按说明书要求进行。

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒操作步骤

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒性能

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。

2.批内与批间应分别小于9%和11%

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒保存条件及有效期:

1. 试剂盒保存:2-8℃

2. 有效期:6个月

3. 产品运输:专用冷藏包,优先顺丰快运,确保产品安全送达。

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒48T/96T分别可以检测多少个样本?

96T检测85个样本,剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。

48T检测37个样本,剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒售后服务是怎么样的?

武汉赛培生产的试剂盒,有专门的生物技术售后团队,实验中需要技术指导的话,可拨打公司技术专线,有一对一的咨询解答服务。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒血清血浆样本该选用哪种真空采血管收集?

血清:不含抗凝剂的采血管/含促凝剂采血管。(通常为红色、黄色、橘色管盖的采血管
血浆:含抗凝剂采血管。(通常为绿色、紫色管盖的采血管 )
样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒代测寄样本有什么要求?
单纯血清血浆,可以用泡沫盒子加冰袋快递运输,若冻存的样本,用干冰运输更好。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒样本保存期限多久?

2-8℃≤1周;  -20℃1周<t≤30天;  -80℃>30天。

 

鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒实验设置复孔有什么好处?
实验设复孔个人认为有以下几个优点:
1.试验中的随机性比较大,设多个复孔可以去处部分偏差大的数据减少检测的误差;
2.设置多个复孔具有统计学意义,否则很难说明数据是偶然的还是真实的;
3.设置复孔可以避免由于主观因素造成的误差;
总的来说是为了,你得到的数据更接近与真实值,避免试验客观和主观误差。

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