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赛培新增产品文献：小鼠SOD,MDA,CAT,TNF-α，IL-1β，IL-6 ELISA试剂盒
发布时间：2022-04-08 12:05:58
微小 ＲＮＡ－１４６ｂ－５ｐ在小胶质细胞糖氧剥夺 ／复氧损伤 中的作用与机制
黄 松１，２ 汪 雷１，２，＊ 周有东１，２ 胡火军１，２ 董元训１，２ 马金阳１，２ ［中图分类号］ Ｒ３６３ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号］ １００５－１７４０（２０２２）０１－００３５－０６ 【摘要】 目的：探究微小 ＲＮＡ－１４６ｂ－５ｐ（ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ）在小胶质细胞糖氧剥夺／复 氧 损 伤（ＯＧＤ／Ｒ）中 的 作 用 及机制。方法：建立小鼠小胶质细胞系 ＥＯＣ１３．３１的 ＯＧＤ／Ｒ模型。将 ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ模拟物、ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ抑制剂 及相应的 阴 性 对 照，分 别 转 染 至 ＥＯＣ１３．３１细 胞 中，然后再分别进行 ＯＧＤ／Ｒ 处 理，分 别 命 名 为 ＯＧＤ／Ｒ＋ｍｉＲ－ １４６ｂ－５ｐｍｉｍｉｃ组、ＯＧＤ／Ｒ＋ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒ组、ＯＧＤ／Ｒ＋ＮＣｍｉｍｉｃ组和 ＯＧＤ／Ｒ＋ＮＣｉｎｈｉｂｉｔｏｒ组，以常规 培养的细胞为对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ组），只行 ＯＧＤ／Ｒ处理的细胞为 ＯＧＤ／Ｒ组，４８ｈ后检测相关指标。实时定量反转录 聚合酶链反应（ｑＲＴ－ＰＣＲ）检测 ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ表达；采用细胞计数试剂盒－８（ＣＣＫ－８）检测细胞存活率；原位末端标记 法（ＴＵＮＥＬ）检测细胞凋亡率；酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过 氧 化 氢 酶（ＣＡＴ）、丙 二 醛 （ＭＤＡ）、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白细胞 介 素－１β（ＩＬ－１β）和 白 细 胞 介 素－６（ＩＬ－６）含 量；蛋白免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ）检测 ＴＲＡＦ６蛋白表达；生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分 析 ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ和 ＴＲＡＦ６之 间 的 关 系。结果：与 Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，ＯＧＤ／Ｒ组中 ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ表 达 显 著 下 调（Ｐ＜０．０１），ＴＲＡＦ６ 蛋白表达显著上调（Ｐ ＜０．０１）。与 ＯＧＤ／Ｒ＋ＮＣｍｉｍｉｃ组比较，ＯＧＤ／Ｒ＋ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐｍｉｍｉｃ组细胞存活率显著增高，凋亡率显著降低， ＭＤＡ 含量显著降低，ＳＯＤ、ＣＡＴ含量显著增高，ＴＮＦ－α，ＩＬ－１β和ＩＬ－６含量显著降低，含 ＴＲＡＦ６－ＷＴ的荧光素酶活 性显著降低，ＴＲＡＦ６蛋白表达显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。与 ＯＧＤ／Ｒ＋ＮＣｉｎｈｉｂｉｔｏｒ组比较，ＯＧＤ／Ｒ＋ｍｉＲ－ １４６ｂ－５ｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒ组细胞的存活 率 显 著 降 低，凋亡率显著升高，ＭＤＡ 含 量 显 著 增 高，ＳＯＤ、ＣＡＴ 含 量 显 著 降 低， ＴＮＦ－α，ＩＬ－１β和ＩＬ－６含量显著升高，ＴＲＡＦ６蛋白表达显著增加（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论：ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ通过靶向 ＴＲＡＦ６促进小胶质细胞 ＯＧＤ／Ｒ模型细胞存活，抑制细胞凋亡，减轻氧化应激和炎症反应。 【关键词】 ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ；ＴＲＡＦ６；糖氧剥夺／复氧损伤；氧化应激；炎症反应
微小RNA-146b-5p...夺_复氧损伤中的作用与机制_黄松.pdf
